選擇真核細胞轉染試劑要考慮哪些因素
更新時間:2022-08-30 點擊次數(shù):837
轉染是采用除病毒感染外的其他方法將核酸(DNA或RNA)人工導入細胞的過程。采用各種化學、生物學或物理方法導入外源性核酸會改變細胞的特性,從而實現(xiàn)細胞基因功能和蛋白質表達研究。轉染后,導入的核酸可以瞬時性地存在于細胞內,只表達一段時間且不會復制,也可以穩(wěn)定地整合至受體基因組內,隨著宿主基因組的復制而復制,各種基因輸送系統(tǒng)采用的術語與該領域的技術進展步調一致,并進一步區(qū)分不同的方法和細胞類型。
轉染技術作為一種分析工具,可將外源基因導入真核細胞,有助于機體表征遺傳、蛋白質合成、細胞生長和發(fā)育等功能的研究。慢病毒載體,腺病毒載體和逆轉錄病毒載體等病毒傳遞系統(tǒng)可用于轉運DNA或RNA到目的細胞中。病毒介導的轉染技術整合效率高,但存在一定的生物安全隱患,且轉染的準備程序比較復雜,對細胞類型有很強的選擇性。此外,在進行病毒轉染之前,需要考慮幾種限制因素,如病毒載體的裂解性質,細胞系包裝和宿主細胞特異性等。
理想的核酸轉染試劑應該是高效、安全、簡單、省時和經(jīng)濟的。隨著轉染方法的不斷發(fā)展以及轉染實驗日益增加,選擇適合的轉染試劑以達到轉染效率顯得尤為重要。在考慮合適的
真核細胞轉染試劑時,應首先確定測定的細胞類型和培養(yǎng)條件。罕見的細胞培養(yǎng),如神經(jīng)元和原代細胞等通常難以轉染,因此可能需要能促進轉染的試劑。此外,在選擇合適的轉染試劑之前,還應該考慮試劑水平和細胞毒性參數(shù)。